|
|
The role of the interaction of LCK with CD4/CD8 coreceptors
Cesneková, Michaela ; Štěpánek, Ondřej (vedoucí práce) ; Černý, Jan (oponent)
LCK kináza zásadne reguluje T bunkovú signalizáciu a interaguje s CD4 a CD8 koreceptormi, ktoré sú nevyhnutné pre vývoj T buniek a diferenciáciu na ich dve základné línie. Úloha koreceptorov, rovnako ako úloha ich väzby na LCK je stále diskutabilná, napriek tomu, že je študovaná už desaťročia. Cieľom tejto diplomovej práce je objasniť dôležitosť väzby LCK s koreceptormi v signalizácii a vývoji CD8+ T buniek a adresovať význam serínových aminokyselinových zbytkov v endocytóze CD4 sprostredkovanej kinázou LCK. Na skúmanie tejto problematiky sme použili rôzne varianty LCK s mutáciami na mieste väzby s koreceptormi alebo v katalytickej doméne, exprimované v myšiach a v bunkových líniách. Ako prvé sme testovali kinázovú aktivitu LCK. V druhej časti sme ukázali, že CD8 má ako závislú tak nezávislú funkciu od väzby s LCK. Potom sme skúmali neskorú fázu vývoja CD8+ T buniek a zistili sme, že neprítomnosť LCK-CD8 interakcie sa na fenotype buniek prejavuje len veľmi málo. Ovplyvňuje totiž len CD8+ tymocyty po pozitívnej selekcii a len ich odpoveď na nízkoafinitný antigén. Nakoniec sme ukázali, že CD4 koreceptor s troma mutáciami serínových zbytkov na alanínové je rovnako závislý na väzbe s LCK ako prirodzená forma CD4. Naša práca vrhá nové svetlo na problematiku väzby LCK s koreceptormi a podčiarkuje jej...
|
|
|
The Role of Lck Kinase in T-cell Antigen Receptor Signaling
Němec, Dušan ; Štěpánek, Ondřej (vedoucí práce) ; Rösel, Daniel (oponent)
Aktivita LCK kinázy je nezbytně nutná pro zahájení procesu aktivace T lymfocytu. Primární funkcí LCK je převod informace o vazbě pMHC glykoproteinů na TCR do vnitřního prostředí buňky. Výsledkem kaskády, jež aktivní LCK spouští, je aktivace T buňky, produkce cytokinů, diferenciace a klonální expanze. Tato práce poskytuje souhrn současných znalostí o LCK kináze a její nenahraditelné roli v TCR signalizaci a stejně tak přehled nejvýznamnějších regulátorů a interakčních molekul. Dále pak popisuje význam interakce LCK s koreceptory pro optimální TCR signalizaci a fyziologický vývoj thymocytů a též zmiňuje diskutovanou roli LCK jako adaptorového proteinu T buněk. Klíčová slova: LCK, T lymfocyt, antigen, kináza, enzym
|
|
|
Identification of a new mechanism of Lck regulation via its C-terminal sequence
Valečka, Jan ; Filipp, Dominik (vedoucí práce) ; Vomastek, Tomáš (oponent)
Aktivace T-lymfocytů je složitý proces zcela zásadní pro správnou funkci imunitního systému. Jako takový byl v minulosti důkladně zkoumán a jeho základní rysy jsou velmi dobře popsány. Neplatí to ovšem pro všechny události, které během T-buněčné signalizace nastávají. Po stimulaci T-buněčného receptoru kináza Lck z rodiny Src zajišťuje spuštění signalizace fosforylací tyrosinů. Fosforylace dalších proteinů je závislá na přesunutí Lck do jiných kompartmentů plazmatické membrány, takzvaných lipidových raftů. V lipidových raftech je Lck v blízkosti svých substrátů, které a aktivuje a které následně spouští další signalizaci. Kritickou částí tohoto procesu je translokace Lck do lipidových raftů, jejíž mechanismus zůstává dosud neprozkoumaný, a jako takový je objektem značného akademického i klinického zájmu. Již dříve jsme identifikovali adaptorový protein RACK1 jakožto kandidátní protein zprostředkovávající redistrubuci Lck do lipidových raftů pomocí propojení Lck s mikrotubulární sítí. V této práci jsme analyzovali strukturní znaky a funkci RACK1 v interakci s Lck. S využitím buněčných linií SYF exprimující buď přirozené nebo různě mutované formy Lck zde ukazujeme, že plně funkční SH3 a SH2 domény Lck jsou nezbytné pro efektivní vytvoření komplexu RACK1-Lck. Také jsme zjistili malý, ale...
|
host ::
RSS.